差示掃描量熱法如何測量生物分子穩定性
點擊次數:407 發布時間:2022-08-26
差示掃描量熱法如何測量生物分子穩定性
差示掃描量熱法(主要用于表征生物分子(如蛋白質)的穩定性。重要的是,它是對其天然形式的生物分子的直接測量。差示掃描量熱法測量可以提供關于熱穩定性的數據,并作為結構指紋來評估構象。通過以恒定速率加熱分子,測量與生物分子熱變性相關的熱量變化。差示掃描量熱法的優點;由于差示掃描量熱法依賴于熱測量,因此可以表征天然生物分子,而不必具有光學透明的樣品。通過差示掃描量熱法測量的特性提供了熔化溫度,但也提供了生物分子內折疊和展開力的數據。
差示掃描量熱法經常用于藥物開發??梢允褂脽崃坑嫷囊恍╆P鍵領域包括:生物治療開發中穩定蛋白質和潛在候選物的選擇和表征;配體的相互作用研究;制造和純化條件的優化;確定液體制劑的條件;了解基本平衡熱力學
要了解差示掃描量熱法的工作原理及其可為準確生物分子測量提供的好處,了解基本平衡熱力學非常重要。本質上,蛋白質和其他生物分子可以在N和D構象之間轉移:N–結構化、天然和生物活性構象;D–非結構化、變性和無活性的構象;這種轉移是通過溫度升高超過特定范圍而發生的。該過程不僅限于蛋白質。其他受影響的生物分子包括:有機聚合物;生物大分子,如DNA和脂質;差示掃描量熱法中使用的儀器;用于差示掃描量熱法測量的關鍵儀器是熱量計。較新的型號,在采樣和分析方面提供了許多自動化優勢。樣品加載后儀器的無人值守操作可以節省操作員的時間,提高工作效率。自動化數據分析可以更快地生成高度可重復的熱穩定性數據并符合法規要求。差示掃描量熱法儀器使用和協議;正確的使用方法和協議對于確保正確準備儀器和樣品以及安全執行實驗至關重要。